试剂triton中文_

1.在提取过程中,加入triton-x100,巯基乙醇,和EDTA作用是什么?

2.哪些试验试剂容易致癌，需要谨慎使用？

3.非干扰型蛋白浓度测定用什么试剂去除triton

4.核酸提取试剂中的洗脱液的作用

5.bca蛋白浓度测定

6.triton X-100单独处理细菌会是什么结果？

7.bca法测蛋白浓度原理

Triton X-100 一般室温放置就行了，阴凉处保存。

其他类的Triton 一般保质期2年。

具体的这些数据你可以到一些大的试剂供应商网站如SIGMA、Invitrogen查它的MSDS。里面一般有保存方法、生物降解之类的。

在提取过程中,加入triton-x100,巯基乙醇,和EDTA作用是什么?

提取线粒体dna方法：（仅供参考）

（1）Triton法：　取10的7次方细胞沉淀,悬浮于5ml的Triton溶解液中.温和振荡片刻后,室温下放置10min.反应完毕的溶液以8000r/min离心1min,上清即为mtDNA.

（2）碱变性法：　取107细胞沉淀,依次加入溶液A(4℃)150Λl,冰浴中将沉淀吹打分散后加入300Λl溶液B(常温),将Eppendrof管缓慢颠倒10次,冰浴裂解变性6～8min,再加入225Λl溶液C(0～4℃),轻柔混匀,冰浴复性20～25min.反应完毕的溶液以10000r?min离心6min,4℃,取上清.1.3.3改进高盐沉淀法[3]　取107细胞沉淀,加入溶液?5500Λl,混匀,2000r/min,10min,弃上清.沉淀加溶液?5500Λl,混匀,3500r/min,10min,弃上清.沉淀加溶液?950Λl,混匀后加入20mg/ml蛋白酶K50Λl和10%SDS120Λl,快速混匀.40℃过夜或50℃4h.加入300Λl饱和醋酸钠,混匀,轻摇15S.15000r/min,4℃,15min,取上清Eppendrof管中.取上清后步骤相同.上清中加入等体积酚∶氯仿∶异醇(25∶24∶1),温和振荡8min,10000r/min,10min4℃,取上层水相重复该过程抽提一次,轻取上层水相.加入2倍体积冰乙醇或等体积异丙醇,冰浴30min,15000r/min,10min,弃上清.用70%冰乙醇漂洗沉淀,15000r?min,2min,彻底去上清.沉淀于空气中自然部分干燥25min,加入适量RTE液溶解.贮于4℃

哪些试验试剂容易致癌，需要谨慎使用？

Triton X100一般在阻断缓冲液中或稀释缓冲液中使用,由于存在疏水结构域,整合蛋白和膜的结合非常紧密,用此试剂可才能从膜上洗涤下来.

巯基乙醇的作用可能有催化蛋白质完全变性和解聚,解离成亚基或单个肽链.

EDTA能与Al3+、Fe3+、Ti4+、Mn2+、Cu2+、Pb2+、Zn2+、Ni2+、Co2+等离定量作用.

具体对提取有什么作用~我也不是很清楚~你自已再想想吧!我只知道这些药品的理论.

非干扰型蛋白浓度测定用什么试剂去除triton

针对“中山二院乳腺外科研究团队多人患癌”这一网络传言，院方迅速给出了回应；但对于普通公众来说，“辟谣”的置信度未必强于谣言。这也使得人们开始担忧促癌试剂可能的作恶能力。然而，我们需要明确的是，并非所有的促癌试剂都具有致癌性，只有特定类型的物质才有可能促进癌症的发生。那么哪些试验试剂容易致癌，需要谨慎使用？接下来我们就来具体了解一下吧。

一、哪些试验试剂容易致癌，需要谨慎使用？

实验室有毒的化学试剂很多，在得到实验结果同时关注获得数据过程中的风险和危害，做自己健康的第一责任人，并且尽己所能去保护周围人的实验安全。

化学实验常用有毒试剂

二甲基亚砜 DMSO?分子式：C2H6OS CAS：67-68-5

DMSO是一种渗透性保护剂，能够降低细胞冰点，减少冰晶的形成，减轻自由基对细胞损害，改变生物膜对电解质、药物、毒物和代谢产物的通透性。研究表明：DMSO存在严重的毒性作用，与蛋白质疏水集团发生作用，导致蛋白质变性，具有血管毒性和肝肾毒性。最为常见的症状为恶心、呕吐、皮疹及在皮肤和呼出的气体中有大蒜、洋葱、牡蛎味。

应取防护措施：DMSO毒性比较强，使用时要避免其挥发，准备1%-5%的氨水备用，若皮肤不慎沾上，要用大量的水和稀氨水洗涤。

溴化乙锭 EB?分子式：C21H20BrN3 CAS：1239-45-8

溴化乙锭是一种高度灵敏的荧光染色剂，用于观察琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶中的DNA。溴化乙锭用标准302nm 紫外光透射仪激发并放射出橙红色信号，观察琼脂糖凝胶中DNA最常用的方法是利用荧光染料溴化乙锭进行染色。溴化乙锭是强诱变剂，具有高致癌性，会在60－70时蒸发（所以最好不要在凝胶太热时使用）（当EB用量过多时，可以在室温用水将已染色的凝胶浸泡20min，以降低未结合的EB引起的背景荧光）。

应取防护措施：溴化乙锭具有一定的毒性，实验结束后，应对含EB的溶液进行净化处理再行弃置，以避免污染环境和危害人体健康

?注意事项?

切勿吸入粉尘；不慎与眼睛接触后，请立即用大量清水冲洗并征求医生意见；穿戴适当的防护服、手套和护目镜或面具；若发生事故或感不适，立即就医(可能的话，出示其标签)；皮肤接触及吞食有害；吸入有极高毒性；刺激眼睛、呼吸系统和皮肤；可能有不可逆后果的危险。

二乙基焦炭酸酯 DEPC

DEPC即二乙基焦碳酸酯，可灭活各种蛋白质，是RNA酶的强抑制剂，是一种潜在的致癌物质。

应取防护措施：操作中应尽量在通风条件下进行，并避免接触皮肤。DEPC毒性并不是很强，但吸入的毒性是最强的，使用时必须佩戴口罩。不小心沾到手上要立即冲洗。

丙烯酰胺 Acrylamide?分子式：C3H5NO CAS：79-06-1

丙烯酰胺属于中等毒性物质，可通过皮肤吸收及呼吸道进入人体，丙烯酰胺的危害主要是引起神经毒性，同时还有生殖、发育毒性。神经毒性表现为周围神经退行性变化和大脑中涉及学习、记忆和其他认知功能部位的退行性变化。实验还显示丙烯酰胺是一种可能致癌物，职业接触人群的流行病学观察表明，长期低剂量接触丙烯酰胺会出现嗜睡、情绪和记忆改变、幻觉和震颤等症状，伴随末梢神经如手套样感觉、出汗和肌肉无力。累积毒性，不容易排毒。

应取防护措施：在搬运和使用中必须穿戴好防护用具，如防毒服，防毒口罩及防毒手套等。

二硫苏糖醇 DTT?分子式：C4H10O2S2 CAS：3483-12-3

二硫苏糖醇是一种小分子有机还原剂，散发出难闻的气味。可因吸入、咽下或皮肤吸收而危害健康。

应取防护措施：当使用固体或高浓度储存液时，戴手套和护目镜，在通风橱中操作。

四甲基乙二胺 DMSO?分子式：C6H16N2 CAS：110-18-9

四甲基乙二胺是一种无色透明的液体，有微腥臭味，在分子生物学中，可以用于配制SDS-PE胶。TEMED可以催化APS产生自由基，从而加速聚丙烯酰胺凝胶聚合，可作为促凝剂使用 。四甲基乙二胺高度易燃，吸入和吞食有害，可引起灼伤。

应取防护措施：防止误吸，操作时快速，存放时密封。

苯甲基磺酰氟 PM?分子式：C7H7FO2S CAS：329-98-6

苯甲基磺酰氟是一种毒性较强的胆碱酯酶抑制剂，白色至微**针状结晶或粉末。对湿敏感，难溶于水，且在水溶液中非常不稳定，容易分解。可溶于异丙醇、乙醇、甲醇、二甲苯和石油醚，有毒，有腐蚀性。对呼吸道黏膜、眼睛和皮肤有非常大的破坏性，可因吸入、咽下或皮肤吸收而致命。

应取防护措施：戴合适的手套和安全眼镜，始终在化学通风橱里使用。在接触到的情况下，要立即用大量的水冲洗眼睛和皮肤，已污染的工作服要丢弃掉。

三氯甲烷 CHCl3?分子式：CHCl3 CAS：67-66-3

三氯甲烷是一种致癌剂，对皮肤、眼睛、黏膜和呼吸道有刺激作用，可损害肝和肾。三氯甲烷易挥发，要避免吸入挥发的气体。无色透明液体，有特殊气味，味甜，高折光，不燃，质重，易挥发。对光敏感，遇光照会与空气中的氧作用，逐渐分解而生成剧毒的光气（碳酰氯）和氯化氢。可加入0.6%-1%的乙醇作为稳定剂，能与乙醇、苯、、石油醚、四氯化碳、二硫化碳和油类等混溶，25℃时溶于200mL水。2017年，世界卫生组织国际癌症研究机构公布的致癌物清单初步整理参考，氯仿在2B类致癌物清单中。

应取防护措施：操作时戴合适的手套和安全眼镜并始终在化学通风橱里进行。

?急救措施?

皮肤接触：立即脱去污染的衣着，用大量流动清水冲洗至少15分钟，就医；

眼睛接触：立即提起眼睑，用大量流动清水或生理盐水彻底冲洗至少15分钟，就医；

吸入：迅速脱离现场至空气新鲜处，保持呼吸道畅通，如呼吸困难，给输氧；如呼吸停止，立即进行人工呼吸，就医；

食入：饮足量温水，催吐，就医。

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?消防措施?

操作注意事项：密闭操作，局部排风。操作人员必须经过专门培训，严格遵守操作规程，建议操作人员佩戴直接式防毒面具（半面罩），带化学安全防护眼镜，穿放毒物渗透工作服，戴防化学品手套。防止蒸汽泄漏到工作场所空气中。避免与碱类、铝接触。搬运时要轻装轻卸，防止包装及容器损坏，配备泄漏应急处理设备，到空的容器可能残留有害物；

储存注意事项：储存于阴凉、通风的仓库。远离火种、热源，库温不超过30℃，相对湿度不超过80%，保持容器密封，应与碱类、铝、实用化学品分开存放，切忌混储。

甲醛 HCHO?分子式：CH2O CAS：50-00-0

甲醛具有很大的毒性并易挥发，是一种致癌剂。很容易通过皮肤吸收，对眼睛、黏膜和上呼吸道有刺激和损伤作用。避免吸入其挥发的汽雾。

应取防护措施：要戴合适的手套和安全眼镜。始终在化学通风橱内进行操作。远离热、火花及明火。

吉姆萨Giemsa

吉姆萨染料有极强的毒性，可致命或引起眼睛失明，可通过吸入和皮肤吸收，其可能的危险是不可逆的效应。

应取防护措施：戴合适的手套和安全护目镜。在化学通风橱里操作，不要吸入其粉末。

叠氮钠 NaN3

叠氮钠毒性非常大，它能阻断细胞色素电子运送系统。实验室中含有叠氮钠的溶液要标记清楚。叠氮钠可因吸入、咽下或皮肤吸收而损害健康。

应取防护措施：戴合适的手套和安全护目镜，操作时要格外小心。

十二烷基硫酸钠 SDS?分子式：C21H25N4O6PS CAS：751-21-3

十二烷基硫酸钠有毒，是一种刺激物。可因吸入、咽下或皮肤吸收而损害健康，能造成对眼睛的严重损伤的危险。

应取防护措施：戴合适的手套和安全护目镜，不要吸入其粉末。

聚乙二醇辛基苯基醚 Triton X-100?分子式：(C2H4O)n.C14H22O CAS：9002-93-1

聚乙二醇辛基苯基醚可因吸入、咽下或皮肤吸收而受害，可引起严重的眼睛刺激和灼伤。

应取防护措施：戴合适的手套和护目镜。

过硫酸铵 APS?分子式：H8N2O8S2 CAS：7727-54-0

过硫酸铵对黏膜和上呼吸道组织、眼睛和皮肤有极大危害性。吸入可致命。

应取防护措施：操作时戴合适的手套、安全眼镜和防护服。始终在通风橱里操作，操作完后彻底洗手。

Trizol试剂

Trizol是一种新型总RNA抽提试剂，可以直接从细胞或组织中提取总RNA，含有苯酚、异硫氰酸胍等物质，能迅速破碎细胞并抑制细胞释放出的核酸酶。Trizol的主要成分是有毒物质苯酚，如皮肤接触Trizol请立即用大量去垢剂和清水冲洗，如仍有不适，建议及时就医。

二、实验室如何防癌？

为了防止类似的再次发生，以下是一些建议：

1、实验室管理和安全是至关重要的。

实验室需要建立一套完善的管理制度和安全防护措施，确保工作人员能够在安全的环境中工作。同时，实验人员需要严格遵守实验操作规程，确保试剂的安全使用。这是防止促癌试剂引发癌症的基本保障。

2、加强对实验人员的培训和教育也是非常必要的。

实验人员需要了解促癌试剂的危害以及正确的防护措施，并具备良好的实验习惯和职业道德，确保实验数据的真实性和准确性。这样的培训和教育可以帮助实验人员更好地识别和应对潜在的安全隐患。

3、实验室应建立严格的试剂管理制度

对促癌试剂进行分类管理，加强储存、使用和销毁等环节的管控。定期对实验室进行安全检查，确保实验室环境的安全性。

在进行涉及促癌试剂的实验时，实验人员应做好个人防护，包括佩戴防护服、手套和口罩等。实验室还应配备应急处理设备，以便在发生意外时能够及时处理。

4、安全报告与披露也是非常重要的。

对于实验过程中发现的潜在安全隐患，实验室应及时向有关部门报告，并取措施予以解决。对于可能导致危害的信息，实验室应予以充分披露，以便其他研究人员能够取相应的防范措施。

个人经验：防范促癌试剂作恶需要多方面的努力，包括实验室管理、实验人员培训、试剂管理、个人防护和安全报告与披露等。实验室及其工作人员应时刻保持警惕，确保实验室的安全和实验数据的准确性。此次的发生，提醒我们必须高度重视实验室安全问题，这对于科学研究的重要性不容忽视。为了确保科研工作的安全进行，我们需要各个部门、单位和实验人员的共同努力。通过加强安全管理和培训教育，我们可以降低促癌试剂作恶的可能性，保障科研人员的健康和安全。

核酸提取试剂中的洗脱液的作用

常用紫外分光光度法测定蛋白质含量。 以下引用： 6种方法测定蛋白质含量 一、微量凯氏（kjeldahl）定氮法 样品与浓硫酸共热。含氮有机物即分解产生氨（消化），氨又与硫酸作用，变成硫酸氨。经强碱碱化使之分解放出氨，借蒸汽将氨蒸至酸液中

bca蛋白浓度测定

核酸提取试剂中的洗脱液的作用是固液分离。收集清液。即为核酸。根据核酸试剂中心文件显示。核酸是由许多核苷酸聚合成的生物大分子化合物。为生命的最基本物质之一。洗脱液、吸附物和待提取样品混合并反应。得到吸附有核酸的所述吸附物。所述洗脱液包括：20mmol/l～200mmol/l的nacl、10mmol/l～50mmol/l的tris、10mmol/l～50mmol/l的edta、质量百分含量为0.1％～0.5％的十二烷基硫酸钠、质量百分含量为2％～4％的tritonx-100、0.5mol/l～1mol/l的nabro3及0.5mol/l～1mol/l的异硫氰酸胍。及用洗脱液处理吸附有核酸的吸附物。固液分离并收集清液。得到核酸。

triton X-100单独处理细菌会是什么结果？

BCA蛋白浓度检测是一个实验，是根据吸光值可以推算出蛋白浓度碱性条件下，蛋白将Cu2+还原为Cu+， Cu+与BCA试剂形成紫颜色的络合物，两分子BCA螯合一个Cu+。将该水溶性复合物在562nm处的吸收值，与标准曲线对比，即可计算待测蛋白的浓度。

常用浓度的去垢剂SDS，Triton X-100，Tween不影响检测结果，但受螯合剂(EDTA，EGTA)、还原剂（DTT，巯基乙醇）和脂类的影响。实验中，若发现样品稀释液或裂解液本身背景值较高，可试用Bradford蛋白浓度测定试剂盒。

检测原理：二价铜离子在碱性的条件下，可以被蛋白质还原成一价铜离子，一价铜离子和独特的BCA　Solution　A（含有BCA）相互作用产生敏感的颜色反应。两分子的BCA螯合一个铜离子，形成紫色的反应复合物。该水溶性的复合物在562nm处显示强烈的吸光性，吸光度和蛋白浓度在广泛范围内有良好的线性关系，因此根据吸光值可以推算出蛋白浓度。

原理图：

第一步反应：

第二步反应：

实验步骤：

1、实验器材

可调分光光度计、恒温水浴箱、移液器、移液管、试管若干

2、实验试剂

(1) 试剂A：含1%BCA二钠盐、2%无水碳酸钠、0.16%酒石酸钠、0.4%氢氧化钠、0.95%碳酸氢钠,将上述液体混合后调pH到11.25。

(2) 试剂B: 4%硫酸铜溶液。

(3) BCA工作液：将试剂A和试剂B先分别摇晃混匀，然后按照50:1的比例配置BCA工作液，之后再充分混匀并在24小时内使用。

(4) 蛋白质标准液：可选用牛血清白蛋白（BSA）作为标准蛋白。准确称取150mg牛血清白蛋白,溶于100mL蒸馏水中,即得1.5mg/mL的蛋白质标准液。之后还可以分别吸取不同容量的标准液并与蒸馏水混合稀释成不同浓度的蛋白质标准液。

(5) 待测样品。

3、实验操作

（1）选取7支洁净试管，其中5支标号1-5号管，其他2支分别标签空白管和待测管。按照下表用移液器准确移取相应的标准蛋白溶液或待测样品、蒸馏水和BCA工作液于试管中。

注意：稀释后的标准蛋白溶液或待测样品与BCA工作液混合比例应为1:20。

（2）将上述各试管混匀后置于恒温水浴锅中37℃保温30分钟；

（3）然后吸取各试管中的溶液于比色皿中并用分光光度计的562nm波长比色测定吸光度值；

（4）以蛋白质含量或者浓度为横坐标，吸光度值为纵坐标绘制标准曲线；

（5）将测得的待测蛋白吸光度值代入标准曲线，就可计算得出蛋白质含量或者蛋白质浓度。

操作过程示意图：

方法优缺点

优点：

（1）此方法被广泛选用，操作简便、准确，灵敏度高，试剂稳定性好；

（2）不易受一般浓度去污剂影响，抗干扰能力强；

（3）检测不同蛋白质分子的变异系数也远小于考玛斯亮蓝法；

（4）在20-2000μg/mL浓度大范围内具有良好的线性关系。

缺点：

（1）可能会受螯合剂和高浓度还原剂的影响；

（2）需要30分钟或者更长时间的恒温水浴孵育。

bca法测蛋白浓度原理

由于存在疏水结构域,整合蛋白和膜的结合非常紧密,用此试剂可才能从膜上洗涤下来.

Triton X-100是一种非离子型表面活性剂（或称清洁剂），分子量为646.86（C34H62O11）。它能溶解脂质，以增加抗体对细胞膜的通透性。1%的Triton X-100常用于漂洗组织标本，0.3%的Triton X-100则常用于稀释血清，配制BSA等。

://zhidao.baidu/question/7937436.html?fr=qrl3

变性剂..我也不太清楚...没试过

BCA蛋白浓度检测是一个实验，是根据吸光值可以推算出蛋白浓度.碱性条件下，蛋白将Cu2+还原为Cu+， Cu+与BCA试剂形成紫颜色的络合物，两分子BCA螯合一个Cu+。将该水溶性复合物在562nm处的吸收值，与标准曲线对比，即可计算待测蛋白的浓度。

常用浓度的去垢剂SDS，Triton X-100，Tween不影响检测结果，但受螯合剂(EDTA，EGTA)、还原剂（DTT，巯基乙醇）和脂类的影响。实验中，若发现样品稀释液或裂解液本身背景值较高，可试用Bradford蛋白浓度测定试剂盒。

简介

二价铜离子在碱性的条件下，可以被蛋白质还原成一价铜离子，一价铜离子和独特的BCA　Solution　A（含有BCA）相互作用产生敏感的颜色反应。两分子的BCA螯合一个铜离子，形成紫色的反应复合物。该水溶性的复合物在562nm处显示强烈的吸光性，吸光度和蛋白浓度在广泛范围内有良好的线性关系，因此根据吸光值可以推算出蛋白浓度。

实验试剂

(1) BCA试剂的配制

① 试剂A，1L：分别称取10g BCA (1%)，20g Na2CO3·H2O(2%)，1.6g Na2C4H4O6·2H2O(0.16%)，4g NaOH (0.4%) ，9.5g NaHCO3(0.95%) ，加水至1L，用NaOH或固体NaHCO3调节pH值至11.25。

②试剂B，50ml：取2g CuSO4·5H2O (4%)，加蒸馏水至50ml。

③BCA试剂：取50份试剂A与1份试剂B混合均匀。此试剂可稳定一周。

(2)标准蛋白质溶液：称取0.5g牛血清白蛋白，溶于蒸馏水中并定容至100ml，制成5mg/ml的溶液。用时稀释十倍。