ptio自由基清除法_abts自由基清除能力的测定原理

1.自由基清除实验为什么选择dpph和as

2.ABTS+测抗氧化性原理是什么

3.dpph自由基清除原理

4.蓝莓酵素的副作用有哪些？

5.抗氧化活性测定？

6.抗氧化性怎么检验

1)ABTS+.自由基清除能力的测定

ABTS+.自由基的制备：

将7mmol／L ABTS储备液和2．45mmol／L高硫酸钾(最终浓度)混合，在室温、避光的条件下静置过夜，形成ABTS”自由基储备液。使用前用O．1mol／L磷酸盐缓冲液(pH7．4)稀释成工作液，使其在734nnl处的吸光值为O．70-O．02。

绘制标准曲线：

配制一系列浓度的Trolox溶液(0—3mmol／L)。20uL不同浓度的Trolox溶液与2mLABTS+.工作液混合，反应6min后在734nm读取吸光值，以Trolox溶液浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线

ABTS+.自由基清除能力测定：

20uL消化液与2 mLABTS+.工作液混合，反应6min后在734 nln读取吸光值。ABTS+.自由基清除能力用Trolox等价抗氧化能力表示(TEAC，umol／L)。

请问下各位大侠，ABTS+.自由基清除能力如何用Trolox等价抗氧化能力表示。最好举个例子，

自由基清除实验为什么选择dpph和as

高粱谷粒中的酚类物质比较丰富,主要以游离酚为主。

1、本文提取了高粱糠中的游离酚、可溶性酯型酚、可溶性苷型酚、束缚型酯型酚和束缚型苷型酚,用高效液相色谱法测定其中15种酚类化合物的含量,并对抗氧化能力进行研究,其中包括DPPH自由基、ABTS自由基、O2-自由基清除率的测定,以及Fe3+还原力的测定实验等。

实验结果表明:

1、本实验研究的高粱糠的游离酚、可溶性酯型酚、可溶性苷型酚、束缚型酯型酚和束缚型苷型酚的含量分别为645.27、138.57、48.67、118.92、176.06?mg?GAE/100?g?DW;阿魏酸和水杨酸的含量较高,分别为39.04%和28.04%,3,4-二羟基苯甲酸的含量最低(0.09%);阿魏酸主要以束缚型的形式存在。

2、可溶性酚中的异绿原酸的含量较高,而游离酚中水杨酸的含量最高;不同存在形态的酚类物质的抗氧化能力在不同的抗氧化体系中略有差异,总的来说,束缚型酯型酚、束缚型苷型酚、可溶性酯型酚的抗氧化能力较强,虽然游离酚含量最高,但其抗氧化能力较弱。

ABTS+测抗氧化性原理是什么

中文名：2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐别名：2,2’-连氮基-双-(3-乙基苯并二氢噻唑啉-6-磺酸)分子式：C18H24N6O6S4分子量：548.68ABTS法是使用最广泛的间接检测方法，可用于亲水性和亲脂性物质抗氧化能力测定。ABTs经氧化后生成稳定的蓝绿色阳离子自由基ABTs+·，能溶于水相或酸性乙醇介质中，在414、645、734和815nm处有最大吸收。被测物质加入ABTS+·溶液后，所含抗氧化成分能与ABTs+·发生反应而使反应体系褪色。在ABTs+·的最大吸收波长(一般选择734nm)检测吸光度的变化，并与6-羟基-2，5，7，8．四甲基苯并二氢吡喃-2一羧酸[类似于Ⅶ的水溶性物质]标准对照体系比较就能换算出被测物质总的抗氧化能力(TEAC值，即每分子抗氧化物质捕捉ABTS+·的数目)。

dpph自由基清除原理

ABTS+测抗氧化性原理是通过漆酶氧化ABTS的速率来决定漆酶酶活力的大小。

2

,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐，如果与过二硫酸钾反应，可以生成绿色的ABTS自由基。该自由基在734nm有最大吸收，所以，通过检测734nm的吸光度，可以测定的其浓度。

一个物质加入到ABTS自由基溶液后，如果734nm的吸光度降低，则说明该物质具有自由基清除活性，属于抗氧化剂。该法称为ABTS自由基清除法，可以用评价植物（或中草药抽提物）、纯化合物的抗氧化能力的。

此外，可以对血浆、血清、唾液、尿液等各种体液，细胞或组织等裂解液或各种抗氧化物(antioxidant)溶液的总抗氧化能力进行检测的试剂盒。

扩展资料

以ABTS（7mmol, 10 equiv.）+K2S2O8(4.9mmol, 7

equiv.)的水溶液按1:1的体积比混合，避光情况下储存12-16h，第二天以乙醇稀释40-60倍，摇匀，静置5min，放入比色皿中测734nm的吸光度（0.7左右）。

测试吸光度随时间变化关系，时长为30min，发现吸光度有很明显的下降，30min大概降到0.45左右，换做水稀释时，吸光度下降更为严重，30min大概降到0.15左右。后面要测特定物质湮灭自由基的能力，这种情况势必严重干扰结果。

不过，ABTS自由基的生成需要过二硫酸钾氧化，所以，是一个混合物。而且，反应通常需要12小时，比较耗时。用PTIO自由基替代ABTS自由基进行实验，取得不错的实验结果。PTIO自由基不需要氧化，可以现成的化学品溶于水配制，另外，由于反应是在水溶液或者缓冲液中进行，具有更强的生物相关性。

百度百科-ABTS

蓝莓酵素的副作用有哪些？

dpph自由基清除原理：

DPPH自由基有单电子在517nm处有一强吸收其醇溶液呈紫色的特性，结论， DPPH法名称:1，它的稳定性主要来自3个苯环的共振稳定作用及空间障碍。

中文名：22联氮二(3乙基苯并噻唑6磺酸)二铵盐别名：22’连氮基双(3乙基苯并二氢噻唑啉6磺酸)分子式：C18H24N6O6S4分子量：54868ABTS法是使用最广泛的间接检测方法，当有自由基清除剂存在时由于与其单电子配道对而使其吸收逐渐消失其褪色程与其接受的。

dpph性质应用：

DPPH具有几个不同结晶形态，它们的晶格对称性和熔点(m.p.)存在差异。商品化的粉末是不同晶相的混合物，熔点在130℃附近。DPPH-Ⅰ(m.p. 106℃)是正交晶系，DPPH-Ⅱ(m.p. 137℃)是无定形态，DPPH-Ⅲ(m.p. 128-129℃)是三斜晶系。

DPPH是一种很稳定的氮中心的自由基，它的稳定性主要来自3个苯环的ππ共-轭作用及空间障碍，使夹在中间的氮原子上不成对的电子不能发挥其应有的电子成对作用。作为一种稳定的自由基，DPPH可以捕获("清除")其他的自由基。

因此通过加入DPPH后观察某一化学反应的速率是否减慢，来作为这一反应是否具有自由基反应本质的指标。由于DPPH自由基在以300~400之间为中心处具有强烈的吸收，因此在溶液中呈现深紫色，并且在被中和之后会变为无色或浅**。

利用这一特性可以直观地检测反应的过程，通过记录DPPH在在520nm吸光度值或者EPR信号的变化可以得到初始自由基的量。

抗氧化活性测定？

蓝莓中的植物抗毒素“蝶芪”没有副作用。

以"蓝莓"为材料,用微生物酵母发酵而来的，含有总酚、SOD、羟基自由基清除能力、DPPH自由基清除能力和ABTS自由基清除能力等的酵素。

服用酵素的作用根据现代医学研究，酵素可提供人体以下四个功能：增进消化功能、促进营养吸收将营养转化为有效能量进行体内净化之；作用参与人体所有新陈代谢过程。

扩展资料：

酵素成分包含来自植物原料和微生物所提供的各种营养素和天然植物中的植物类功能性化学成。

以及发酵生成的一些生理活性物质，包括维生素、氨基酸、多糖、肽类、多酚类、黄酮类、矿物元素和有机酸，GABA、SOD、过氧化氢酶等抗氧化成分，各种益生菌，醇类、酯类、酶类以及外添加的低聚糖，酶、牛磺酸等功能性成分之故。

参考资料：

抗氧化性怎么检验

1、ORAC

ORAC是Oxygen Radical Absorption Capacity（氧化自由基吸收能力）的缩写，是一种测试抗氧化能力的评价方法体系。

ORAC抗氧化测试包括对：过氧化自由基（含亲水性、亲脂性）、羟基自由基、过氧亚硝基、单线态氧、超氧阴离子 这五种人体最主要的活性氧自由基进行全面的分析，能有效得出样品的抗氧化实际能力及分布情况。

ORAC抗氧化生物测试是比普通抗氧化测试的更高一层的测试方案。利用人体细胞有效测试出样品的抗氧化力（生物利用度）。

2、其他评价方法

抗氧化不仅仅是一个概念，对生物体抗氧化的效果是可以量化测定的，作为动物实验一般是服用抗氧化剂一定时间后，测定血液中的酯质过氧化产物丙二醛变化、以及肝脏匀浆中超氧化物歧化酶SOD和谷胱甘肽过氧化物酶GSH-PX的活力变化。

从上述两种酶和MDA的变化状况来判定抗氧化的强度及效果。作为人体不可能测肝脏匀浆，可以测定血液或者尿液中的MDA，以及血液中的SOD、GXH-PX来判定抗氧化的效果。

3、抗油脂过氧化力测定

脂类包括的范围很广，构成生物膜的主要成分，脂类中的不饱和脂肪酸可以过氧化，脂类过氧化过程中会产生L、LO、LOO-等自由基以及LOOH，这些产物会损伤生物细胞。因此，能够抑制脂类过氧化具有重要的生物学意义。

A硫氰酸铁法FTC：硫氰酸铁盐(FTC)比色法是基于在酸性条件下，脂质氧化形成的过氧化物可将Fe2+氧化成Fe3+，然后Fe3+与硫氰酸根离子可形成在480-515nm内有最大吸收的红色络合物。通常用500nm处吸光值的高低表示物质抗脂质过氧化的能力，吸光值越小，表明物质的抗脂质过氧化能力越强。

B硫代巴比妥酸反应物TBARs法：是评价油脂的氧化程度的常用方法。油脂或者亚油酸氧化后的终产物主要是丙二醛，这些过氧化产物与硫代巴比妥酸作用生成有色化合物，该有色化合物在530 nm左右有吸收。

4、清除DPPH能力的侧定

DP是一种早期合成的有机自由基，常用来评估抗氧化物的供氢能力，它在有机溶剂中非常稳定，呈紫色，而且在处有一个特征吸收峰，当遇到自由基清除剂时，DPPH的孤对电子被配对而使其退色，也就是在最大吸收波长处的吸光值变小。因此，可通过测定吸光值的变化来评价样品对DPPH自由基的清除效果。

5、还原能力的测定

还原力的测定是检验样品是否是良好的电

FRAP，ABTS以及ORAC法等等；

FRAP：即"亚铁还原能力实验"，一种在低pH条件下，利用亚铁离子与TPTZ生成蓝紫色复合物来测量样品抗氧化能力的实验，广泛运用于食品与保健品的抗氧化能力分析；

ABTS：总抗氧化能力检测试剂盒(ABTS法)，即Total Antioxidant Capacity Assay Kit with ABTS method，简称T-AOC Assay Kit，是一种用2,2'-azino-bis作为显色剂，可以对血浆、血清、唾液、尿液等各种体液，细胞或组织等裂解液、植物或中草药抽提液、或各种抗氧化物(antioxidant)溶液的总抗氧化能力进行检测的试剂盒;

ORAC：ORAC是氧化自由基吸收能力的缩写，氧化自由基吸收能力又称为抗氧化能力。ORAC分析方法是根据自由基破坏荧光探针，使荧光强度产生变化原理，以维生素E水溶性类似物Trolox为定量标准，使用荧光微孔板分析仪进行分析。荧光强度的变化大小反映自由基破坏的程度。在抗氧化剂存在时，它可以抑制由自由基引起的荧光变化。抑制程度反映了它对自由基的抗氧化能力。